Trong Ambulance Simulator 3D, bạn sẽ làm việc như một tài xế xe cứu thương. Nhiệm vụ của bạn là vận chuyển các nạn nhân đến các bệnh viện của thành phố. Ở phía trước của bạn trên màn hình, bạn sẽ thấy xe cấp cứu của bạn, sẽ chạy dọc theo đường phố thành phố dần dần tăng tốc độ. Ở bên cạnh, bạn sẽ thấy một bản đồ, trên đó có một chấm màu đỏ sẽ đánh dấu nơi bạn sẽ phải đến. Bạn khéo léo vượt các phương tiện đang lưu thông trên đường và khéo léo vượt qua các ngã rẽ sẽ phải đến được địa điểm này trong một thời gian nhất định. Tại đó, nạn nhân sẽ được chất lên xe và bạn sẽ đưa đến bệnh viện gần nhất.
